БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 1, с. 11–19
УДК 576.311.347
Физико-химическая и функциональная характеристика митохондриальных полирибосом дрожжей Saccharomyces cerevisiae
Лаборатория биохимической генетики научно-исследовательского института экспериментальной медицины АМН СССР, Ленинград
Поступила в редакцию 04.11.1978
Аннотация
Проведено сравнительное исследование различных методов очистки митохондриальных полирибосом дрожжей Saccharomyces cerevisiae от примеси цитоплазматических полирибосом, прочно связанных с наружной мембраной митохондрий. Показано, что только обработка митохондрий 0,5 М KCl — 1 мМ пуромицином дает возможность получить высокоочищенную фракцию мтПРС с sw, 20= 100—200 S, состоящую из 2—3 мономеров. Анализ насцентных полипептидов, связанных с мтПРС, импульсно меченных [14C] лейцином в присутствии циклогексимида, а также преформированных полипептидов, уже встроенных в мембрану, методом гель-фильтрации в денатурирующих условиях выявил преобладание полипептидов с молекулярной массой 10000—11000 дальтон. По данным изоэлектрофокусирования меченых полипептидов в присутствии амфолинов, pH 3—10, они располагаются преимущественно в зоне pH 9 и, следовательно, обладают основными свойствами.