БИОХИМИЯ, 1979, том 44, вып. 1, с. 57–66
УДК 576.853.23:547.963.3
Изучение плавления и реассоциации двуспиральной РНК вируса энцефаломиокардита
Кафедра вирусологии и Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ, Москва
Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 29.03.1978
Аннотация
Показано, что добавление к растворам диметилсульфоксида невысоких концентраций LiCl приводит к значительному снижению температуры плавления двуспиральной РНК (дсРНК). Добавление NaCl, напротив, приводит к увеличению температуры плавления. Используя обнаруженный эффект, можно проводить опыты по плавлению и реассоциации дсРНК в весьма мягких условиях. Было обнаружено, что скорость реассоциацин дсРНК, вируса энцефаломиокардита (ЭМК) значительно выше, чем скорость реассоциации дсРНК родственного вируса полиомиелита. Добавление синтетического гомополимера поли(C) к гибридизационной смеси приводит к снижению скорости реассоциации первой РНК, но не влияет на скорость реассоциацин второй. По-видимому, гомополимерные последовательности поли(C) и поли(G), присутствующие соответственно в «плюс»- и «минус»-цепях этой РНК, определяют аномально высокую скорость реассоциации. Кроме того, показано, что расплавленная дсРНК вируса ЭМК при инкубации в водном растворе с высокой ионной силой способна образовывать агрегаты с повышенной устойчивостью к РНКазе. Эта агрегация происходит из-за наличия в молекуле гомополимерных участков поли(A) и поли(U). Таким образом, описанные ранее затруднения при плавлении дсРНК вируса ЭМК связаны как с тугоплавкостью сегмента поли(G): поли(C), так и с повышенной тенденцией цепей этой РНК к реассоциации.