БИОХИМИЯ, 1979, том 44, вып. 1, с. 3–17
УДК 577.156
Методы определения равновесных и кинетических параметров взаимодействия белковых ингибиторов с протеиназами
Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Институт биологической и медицинской химии АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 23.05.1978
Аннотация
Изложены представления о механизме взаимодействия протеолитических ферментов с их природными белковыми ингибиторами. Приведена расширенная формально-кинетическая схема процесса взаимодействия. Обсуждается правомерность применения упрощенной схемы для описания количественных закономерностей образования и распада прочного фермент-ингибиторного комплекса. Критически рассмотрены подходы к определению кинетических и равновесных параметров взаимодействия сериновых протеиназ (трипсина и химотрипсина) с белковыми ингибиторами животного и растительного происхождения. Приведены уравнения, описывающие стационарную скорость ферментативного гидролиза соответствующего субстрата как функцию концентраций реагирующих веществ (субстрата, ингибитора и фермента) и кинетических и равновесных констант. Применение некоторых методов проиллюстрировано на примере взаимодействия трипсина и химотрипсина с ингибитором из поджелудочной железы крупного рогатого скота, а также с термо- и кислотостабильным ингибитором из сыворотки крови кролика.