БИОХИМИЯ, 2020, том 85, вып. 6, с. 774–782

УДК 616-006.6

Вовлеченность SASH1 в поддержание стабильной межклеточной адгезии*

© 2020 А.С. Ильницкая, И.Ю. Житняк, Н.А. Глушанкова **

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 115478 Москва, Россия; электронная почта: natglu@hotmail.com

Поступила в редакцию 01.04.2020
После доработки 29.04.2020
Принята к публикации 03.05.2020

DOI: 10.31857/S0320972520060032

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: SASH1, межклеточная адгезия, Е-кадхерин, эпителиально-мезенхимальный переход.

Аннотация

SASH1 является адаптерным сигнальным белком, имеющим в своей структуре SH3 и SAM домены, отвечающие за межбелковые взаимодействия. Выраженное снижение экспрессии SASH1 описано для многих опухолей. С использованием конфокальной микроскопии нами было проведено иммунофлуоресцентное исследование распределения SASH1 в культурах нормальных эпителиальных клеток IAR-20 и клеток линии колоректального рака НТ-29. Нормальные эпителиоциты IAR-20 и эпителиоциты НТ-29, имеющие эпителиальный фенотип, образовывали стабильные линейные межклеточные адгезионные контакты (АК), ассоциированные с кольцевыми актиновыми пучками. В этих клетках SASH1 колокализовался с кольцевыми пучками и линейными АК. В ламеллиподиях SASH1 не детектировался. Под воздействием эпидермального фактора роста клетки IAR-20 и НТ-29 вступали в эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП). ЭМП в культурах IAR-20 и НТ-29 имел существенные различия. Клетки IAR-20 проходили неполный ЭМП, приобретая способность к миграции, но при этом сохраняя Е-кадхерин в радиальных нестабильных АК. SASH1 присутствовал в таких контактах. При прохождении ЭМП клетками НТ-29 наблюдалось полное исчезновение АК, что также приводило к разрушению стабильной межклеточной адгезии. SASH1 уходил из зон межклеточного взаимодействия. Супрессия SASH1 посредством RNA-интерференции вызывала разрушение стабильных линейных АК клеток IAR-20. Через 48 ч после трансфекции siRNA SASH1 в культуре отмечалось появление клеток с мезенхимальным фенотипом. Полученные данные указывают на вовлеченность SASH1 в поддержание стабильной межклеточной адгезии.

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow) http://protein.bio.msu.ru/biokhimiya, в рубрике «Papers in Press», BM20-082, 01.06.2020.

** Адресат для корреспонденции.

Финансирование

Работа поддержана Российским фондом фундаментальных исследований (грант № 18-54-16005). Работа по изучению ЭМП поддержана Российским научным фондом (грант № 16-15-10288).

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Соблюдение этических норм

Настоящая статья не содержит описания выполненных авторами исследований с участием людей или использованием животных в качестве объектов.

Список литературы

1. Zeller, C., Hinzmann, B., Seitz, S., Prokoph, H., Burkhard-Goettges, E., Fischer, J., Jandrig, B., Schwarz, L.-E., Rosenthal, A., and Scherneck, S. (2003) SASH1: a candidate tumor suppressor gene on chromosome 6q24.3 is downregulated in breast cancer, Oncogene, 22, 2972-2983, doi: 10.1038/sj.onc.1206474.

2. Peng, L., Wei, H., and Liren, L. (2014) Promoter methylation assay of SASH1 gene in hepatocellular carcinoma, J. BUON, 19, 1041-1047.

3. Rimkus, C., Martini, M., Friederichs, J., Rosenberg, R., Doll, D., Siewert, J. R., Holzmann, B., and Janssen, K. P. (2006) Prognostic significance of downregulated expression of the candidate tumour suppressor gene SASH1 in colon cancer, Br. J. Cancer, 95, 1419-1423, doi: 10.1038/sj.bjc.6603452.

4. Ren, X., Liu, Y., Tao, Y., Zhu, G., Pei, M., Zhang, J., and Liu, J. (2016) Downregulation of SASH1 correlates with tumor progression and poor prognosis in ovarian carcinoma, Oncol. Lett., 11, 3123-3130, doi: 10.3892/ol.2016.4345.

5. Xie, J., Zhang, W., Zhang, J., and Luan, Y.-F. (2017) Down-regulation of SASH1 correlates with poor prognosis in cervical cancer, Eur. Rev. Med. Pharm. Sci., 21, 3781-3786.

6. He, P., Zhang, H., Sun, C., Chen, C., and Jiang, H. (2016) Overexpression of SASH1 Inhibits the proliferation, invasion, and EMT in hepatocarcinoma cells, Oncol. Res., 24, 25-32, doi: 10.3727/096504016X14575597858609.

7. Zong, W., Yu, C., Wang, P., and Dong, L. (2016) Overexpression of SASH1 inhibits TGF-b1-induced EMT in gastric cancer cells, Oncol. Res., 24, 17-23, doi: 10.3727/096504016X14570992647203.

8. Franke, F. C., Müller, J., Abal, M., Medina, E. D., Nitsche, U., Weidmann, H., Chardonnet, S., Ninio, E., and Janssen, K. P. (2018) The tumor suppressor SASH1 interacts with the signal adaptor CRKL to inhibit epithelial–mesenchymal transition and metastasis in colorectal cancer, Cell. Mol. Gastroenterol. Hepatol., 7, 33-53, doi: 10.1016/j.jcmgh.2018.08.007.

9. Franke, F. C., Slusarenko, B. O., Engleitner, T., Johannes, W., Laschinger, M., Rad, R., Nitsche, U., and Janssen, K. P. (2020) Novel role for CRK adaptor proteins as essential components of SRC/FAK signaling for epithelial–mesenchymal transition and colorectal cancer aggressiveness, Int. J. Cancer, 146, doi: 10.1002/ijc.32955.

10. Feller, S. (2001) Crk family adaptors – signalling complex formation and biological roles, Oncogene, 20, 6348-6371, doi: 10.1038/sj.onc.1204779.

11. Krause, M., and Gautreau, A. (2014) Steering cell migration: lamellipodium dynamics and the regulation of directional persistence, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 15, 577-590, doi: 10.1038/nrm3861.

12. Martini, M., Gnann, A., Scheikl, D., Holzmann, B., and Janssen, K. P. (2011) The candidate tumor suppressor SASH1 interacts with the actin cytoskeleton and stimulates cell–matrix adhesion, Int. J. Biochem. Cell. Biol., 43, 1630-1640, doi: 10.1016/j.biocel.2011.07.012.

13. Rottner, K., and Stradal, T. (2016) How distinct Arp2/3 complex variants regulate actin filament assembly, Nat. Cell Biol., 18, 1-3, doi: 10.1038/ncb3293.

14. Lamouille, S., Xu, J., and Derynck, R. (2014) Molecular mechanisms of epithelial-mesenchymal transition, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 15, 178-196, doi: 10.1038/nrm3758.

15. Nieto, M. A., Huang, R. Y., Jackson, R. A., and Thiery, J. P. (2016) EMT: 2016, Cell, 166, 21-45, doi: 10.1016/j.cell.2016.06.028.

16. Zhitnyak, I. Y., Rubtsova, S. N., Litovka, N. I., and Gloushankova, N. A. (2020) Early events in actin cytoskeleton dynamics and E-cadherin-mediated cell–cell adhesion during epithelial–mesenchymal transition, Cells, 9, pii: E578, doi: 10.3390/cells9030578.

17. Dugina, V., Zwaenepoel, I., Gabbiani, G., Clément, S., and Chaponnier, C. (2009) β- and γ-Cytoplasmic actins display distinct distribution and functional diversity, J. Cell Sci., 122, 2980-2988, doi: 10.1242/jcs.041970.

18. Montesano, R., Saint Vincent, L., Drevon, C., and Tomatis, L. (1975) Production of epithelial and mesenchymal tumors with rat liver cells transformed in vitro, Int. J. Cancer, 16, 550-558, doi: 10.1002/ijc.2910160405.

19. Ломакина М. Е., Полесская А., Александрова А. Ю., Готро А. (2016) Поиск новых регуляторов клеточного движения среди недавно обнаруженных партнеров связывания ГТФазы Rac, Успехи молекулярной онкологии, 3, 20.

20. McCormack, J., Welsh, N. J., and Braga, V. M. (2013) Cycling around cell–cell adhesion with Rho GTPase regulators, J. Cell Sci., 126, 379-391, doi: 10.1242/jcs.097923.

21. Yamada, S., and Nelson, W. J. (2007) Localized zones of Rho and Rac activities drive initiation and expansion of epithelial cell-cell adhesion, J. Cell Biol., 178, 517-527, doi: 10.1083/jcb.200701058.

22. Lamorte, L., Royal, I., Naujokas, M., and Park, M. (2002) Crk adapter proteins promote an epithelial-mesenchymal-like transition and are required for HGF-mediated cell spreading and breakdown of epithelial adherens junctions, Mol. Biol. Cell, 13, 1449-1461, doi: 10.1091/mbc.01-10-0477.

23. Furukawa, K. T., Yamashita, K., Sakurai, N., and Ohno, S. (2017) The epithelial circumferential actin belt regulates YAP/TAZ through nucleocytoplasmic shuttling of merlin, Cell Rep., 20, 1435-1447, doi: 10.1016/j.celrep.2017.07.032.