Очистка и изучение свойств ингибитора тиоловых протеаз из легких козы Capra hircus

Аннотация

Две изоформы цистатина (ЦЛК I и ЦЛК II) выделены в гомогенном состоянии из легких козы. Процедура очистки ингибиторов включала в себя фракционирование сульфатом аммония (40–60%) и ионообменную хроматографию. Отмечено, что при ПААГ-электрофорезе в неденатурирующих и денатурирующих условиях очищенные ингибиторы мигрировали как отдельные полипептиды. Установлено, что оба белка содержали незначительные количества карбогидратов и не содержали ни свободных –SH-групп, ни дисульфидных связей. Обнаружено, что ЦЛК I ингибировал папаин с большей эффективностью, чем фицин и бромелаин. Показано, что антисыворотка к ЦЛК I дает перекрестную реакцию с ЦЛК II и с цистатином из мозга козы. Установлено, что очищенный ЦЛК I иммунологически гомогенный. Обе изоформы ингибитора сохраняют свою активность при pH 3−10 и при температуре вплоть до 75°. Исследования, проведенные методом КД, а также с использованием методов УФ- и флуоресцентной спектроскопии, показали, что молекула ЦЛК I на 49% состоит из α-спиралей и что в комплексе с папаином молекулы обоих ингибиторов претерпевают конформационные изменения.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: