БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 7, с. 916–922
УДК 577.152.3
Клонирование и характеристика NAD-зависимой белковой деацетилазы (Rv1151c) из Mycobacterium tuberculosis*
1 State Key Laboratory of Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences
2 Graduate School, Chinese Academy of Sciences
3 Department of Molecular Microbiology and Immunology, School of Hygiene and Public Health, Johns Hopkins University
Поступила в редакцию 30.12.2008
После доработки 25.01.2009
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ADP-рибозилтрансфераза, деацетилаза, Mycobacterium tuberculosis, NAD-гликогидролаза, Sir2.
Аннотация
Отмечено, что белки, принадлежащие к семейству Sir2 очень консервативны и катализируют хорошо изученную реакцию NAD-зависимого деацетилирования белка, которая регулирует многие процессы в клетке, включая старение, молчание генов, дифференциацию клеток и пути метаболизма. Rv1151c – гомолог Sir2, выделенный из Mycobacterium tuberculosis, – клонирован и сверхэкспрессирован в клетках Escherichia coli, затем белок очищен до гомогенности с помощью Ni2+-аффинной хроматографии. Установлено, что очищенный рекомбинантный белок демонстрирует характерную NAD-зависимую белковую деацетилазную активность, которую можно ингибировать никотинамидом и другими известными ингибиторами Sir2. Обнаружено, что оптимальная температура Rv1151c 25°, а pH-оптимум 9 ± 1. Показано, что Rv1151c способен деацетилировать ацетил-CoA-синтетазу из M. tuberculosis, однако в отличие от белков семейства Sir2, идентифицированных в других бактериях, Rv1151c демонстрирует субстратнезависимую NAD-гликогидролазную активность, что согласуется с его авто-ADP-рибозилирующей активностью.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Рress, BM08-400, 08.02.2009.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.