БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 7, с. 877–885

УДК 577.24

Очистка и биохимическая характеристика D-Gal-связывающего лектина из икры японского морского зайца Aplysia kurodai*

© 2009 С.М.А. Кавсар 1, Р. Матсумото 1, Ю. Фуайи 1, Х. Юсумитсу 1, Ц. Догасаки 2, М. Хосоно 3, К. Нитта 3, Я. Хамако 4, Т. Матсуи 5, Н. Койама 6, Ю. Озеки 1**

1 Laboratory of Marine Biochemistry, Department of Environmental Biosciences, International Graduate School of Arts and Sciences, Yokohama City University

2 Department of Food and Hygiene, Faculty of Environmental Health Science, Azabu University

3 Division of Cell Recognition Study, Institute of Molecular Biomembrane and Glycobiology, Tohoku Pharmaceutical University

4 Faculty of Medical Management and Information Science, School of Health Sciences, Fujita Health University

5 Department of Biology, School of Health Sciences, Fujita Health University

6 Laboratory of Environmental Biosciences, Y.S.F.H.

Поступила в редакцию 19.09.2008
После доработки 18.02.2009

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Aplysia kurodai, ингибирование пролиферации клеток, D-Gal-связывающий лектин, галактуроновая кислота, морской заяц, резонанс поверхностных плазмонов.

Аннотация

Лектин из икры японского морского зайца Aplysia kurodai (АКL) очищен методом аффинной хроматографии на лактозил-агарозе. Молекулярные массы полученного белка, определенные методом Ds-Na-ПААГ-электрофореза в нередуцирующих и редуцирующих условиях, составили 56 и 32 кДа соответственно. Отмечено, что очищенный АКL вызывал агглютинацию эритроцитов кролика и человека в отсутствие двухвалентных катионов. Установлено, что АКL стабилен при pH 10 и сохраняет способность стимулировать гемагглютинацию даже после преинкубации в течение 1 ч при 80°. Обнаружено, что лектин нестабилен при pH < 5 и теряет свою гемагглютинирующую активность в присутствии β-меркаптоэтанола. Гемагглютинирующая активность АКL ингибировалась под действием D-галактозы, галактуроновой кислоты, метил-α- и метилβ-D-галактопиранозида, лактозы, мелибиозы, асиалофетуина. Константы скоростей образования и диссоциации АКL, определенные методом резонанса поверхностных плазмонов, составили 4,3 · 105 M–1 · с–1 и 2,2 · 10–3 с–1 соответственно. АКL умеренно ингибировал пролиферацию клеток P388 в культуре, причем степень ингибирования зависела от концентрации лектина. В процессе инкубации клеток с АКL их ДНК не фрагментировалась, как при апоптозе, что свидетельствовало о наличии другого, неизвестного механизма ингибирования пролиферации под воздействием этого лектина.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM08-299, 19.04.2009.

** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.