Выявление актиназной активности протеализина^*

Аннотация

Исследована способность протеализина, термолизиноподобной металлопептидазы бактерий Serratia proteamaculans 94, расщеплять актин и матриксную металлопротеазу ММР2. Показано, что протеализин и экстракты бактерий S. proteamaculans 94 гидролизуют в глобулярном актине пептидную связь Gly42–Val43, расположенную в ДНК-азной петле, и связи Gly63–Ile64 и Thr66–Ile67 в нуклеотидной щели молекулы. Если весовое соотношение фермент : субстрат не превышает 1 : 50, 36 кДа-фрагмент актина, образующийся в результате гидролиза связи Gly42–Val43 не подвергается дальнейшему протеолизу. По данным зимографии, протеализин превращает предшественника ММР2 в полипептид с молекулярной массой 66 кДа, характерной для зрелой ММР2, что указывает на возможность активирования ММР2 протеализином. При инкубации S. proteamaculans 94 с клетками карциномы гортани человека Hep-2 бактерии обнаружены в цитоплазме примерно 10% клеток Hep-2, что впервые демонстрирует способность бактерий этого вида к инвазии в эукариотические клетки. Таким образом, S. proteamaculans является еще одним видом бактерий, в которых способность к инвазии сопряжена с синтезом актин-специфической металлопротеазы. Полученные результаты позволяют предположить, что протеализин участвует в инвазии, активируя матриксные металлопротеазы. Представляется, однако, более вероятным, что фактором, способствующим инвазии бактерий S. proteamaculans в эукариотические клетки, является актиназная активность протеализина.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: