Активация и повреждение эндотелиальных клеток при гипоксии/реоксигенации. Влияние внеклеточного pH^*

Аннотация

Нарушение кровотока при окклюзиях и спазмах сосудов приводит к гипоксии и ацидозу, а его последующее восстановление – к реоксигенации и нормализации рН (реалкалинезации) в ишемизированных участках сосудистого русла. В настоящей работе исследовали влияние гипоксии/реоксигенации на активацию и стимуляцию апоптоза культивируемых эндотелиальных клеток человека. Клетки подвергали воздействию гипоксии (2% О₂, 5% СО₂, 93% N₂) в течение 24 ч, а затем реоксигенации (21% О₂, 5% СО₂, 74% N₂) в течение 5 ч. Реоксигенацию проводили при различных рН среды культивирования – 6,4 (сохранение ацидоза после гипоксии), 7,0 и 7,4 (частичная и полная реалкалинизация соответственно). Гипоксия лишь незначительно (на ~30%) повышает содержание молекулы клеточной адгезии ICAM-1 на поверхности клеток, в то время как реоксигенация увеличивает ее экспрессию более чем в два раза. Эффект реоксигенации зависел от кислотности среды – увеличение содержания ICAM-1 было более выражено при рН 7,0, чем при рН 6,4 и 7,4. Ни гипоксия, ни реоксигенация не индуцировали экспрессию двух других молекул клеточной адгезии – VCAM и Е-селектина. Инкубация клеток в условиях гипоксии, но не последующая реоксигенация, стимулировала секрецию фактора Виллебранда и увеличивала более чем в четыре раза его концентрацию в среде культивирования. Процент клеток, содержащих маркер апоптоза, активированную каспазу-3, повышался приблизительно в полтора раза, как в результате воздействия гипоксии, так и последовательной гипоксии/реоксигенации. Максимальные значения достигались при проведении реоксигенации при рН 7,0. Полученные данные свидетельствуют о том, что гипоксия/реоксигенация стимулирует провоспалительную активацию (экспрессия ICAM-1) и апоптоз (активация каспазы-3) эндотелиальных клеток, а рН внеклеточной среды оказывает влияние на оба эти процесса.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: